ssDNA 工艺平台,赋能基因编辑与纳米技术
平台概述
ssDNA(单链 DNA)在基因编辑、测序检测、DNA 信息文库、材料科学等领域具有广泛应用。云心质力 ssDNA 工艺平台提供滚环扩增(RCA)与噬菌体生产两大技术路线,配备自研 LEAP DNA 聚合酶(已获 FDA DMF 备案),可生产从短链到超长链(> 20,000 nt)的 ssDNA,满足从研究级到 GMP 级的全规模需求。
ssDNA 应用领域
基因编辑
CRISPR/Cas9 供体模板,提升编辑效率与特异性,减少脱靶
测序 / 检测
探针、引物、传感器,高特异性与灵敏度
DNA 信息文库
高密度数据存储介质,可达 2.15 亿千兆字节
材料科学
DNA 折纸术、纳米自组装结构
LEAP 酶 — DMF 备案产品
工艺路线一:滚环扩增(RCA)
恒温核酸扩增方法,DNA 聚合酶与环状模板结合,催化 dNTPs 合成单链 DNA 分子
基因合成
根据客户需求合成目标片段
质粒构建与制备
构建至特定骨架,菌株生产并提取超螺旋质粒
模板制备
限制酶酶切、环化目标片段,内切酶切割形成缺口
RCA 反应
缺口化质粒模板进行恒温扩增反应
片段化酶切
脱氧核酶酶切将连续 ssDNA 片段化
ssDNA 分离纯化
层析技术获得高纯度 ssDNA
工艺路线二:噬菌体生产
基于 M13 丝状噬菌体系统,含环状单链 DNA 基因组,可容纳外源 DNA 制备 ssDNA
质粒构建
质粒骨架含噬菌体包装、宿主菌复制与筛选基因序列
噬菌体库
包装噬菌体并建立噬菌体毒种库
噬菌体生产与纯化
优化 MOI、收获时间;去除宿主蛋白、DNA 等杂质
噬菌体基因组提取
裂解噬菌体,提取纯化噬菌体基因组
片段化酶切
脱氧核酶酶切将连续 ssDNA 片段化
ssDNA 分离纯化
层析技术获得高纯度 ssDNA
平台亮点
双技术路线
RCA 滚环扩增 + 噬菌体生产,灵活匹配不同长度与应用需求
LEAP 酶 DMF 备案
自研 LEAP DNA 聚合酶已获 FDA DMF 备案,纯度 > 95%
全规模生产
从 400 mL 到 1000 L 灵活放大,GMP 设施符合 FDA 及 EMA 规范
数智化生产
7×24 小时全天候运转,全自动灌装与在线监控,降低人工成本
冻干灌装能力
研究级和 GMP 级冻干灌装线,冻干工艺开发与放大
全流程服务
从研究服务、工艺开发到 GMP 生产的端到端解决方案